瘦肉精的多種檢測方法

    瘦肉精是一類**，而不是一種特定的物質，是指能夠促進瘦肉生長的飼料添加劑。任何能夠促進瘦肉生長、抑制肥肉生長的物質都可以叫做“瘦肉精”。目前，能夠實現這種功能的物質是一類叫做β-興奮劑（β-agonist）的**，比如在中國造成中毒的克倫特羅（clenbuterol）和美國允許使用的雷托巴胺（Ractopamine）。在中國，通常所說的“瘦肉精”則是指克倫特羅。它曾經作為**用于**支氣管**，后由于其副作用太大而遭禁用。

中文名：瘦肉精；克倫特羅；學名鹽酸克倫特羅；是一種平喘藥。該**既不是獸藥，也不是飼料添加劑，而是腎上腺類神經興奮劑。鹽酸雙氯醇胺；克喘素；氨哮素；氨必妥；氨雙氯喘通；氨雙氯醇胺。
英文名：CLENBUTEROL
CAS: 37148-27-9
理化特性：白色或類白色的結晶粉末，無臭、味苦，熔點161℃，溶于水、乙醇，微溶于丙酮，不溶于乙醚。    


檢測
氣相色譜-質譜法（GC-MS）
GC-MS法優點是把色譜高效快速的分離效果和質譜高靈敏度的定性分析有機合起來，能在多種殘留物同時存在的情況下對某種特定的殘留物進行定性、定量分析，而且具更高的檢測極限。Fente C. A等用GC-MS法檢測牛毛中CLB的殘留，*低檢測限為5ng/g；Pteer Batioens應用氣相色譜－串聯質譜法(GC-MS-MS)對牛、羊、豬組織中的CLB含量進行檢測，*低檢測限為2ng/g；劉琪等用GC-MS法（EI離子源）檢測豬尿中的CLB，檢測限為0.5ng/mL；VanRhijin等用**基硅基或2-二甲基硅基嗎啉衍生物檢測尿提取物中的CLB，衍生物用電脈沖方式或化學離子化方式掃描，會產生更高的靈敏度。另外，GC-MS法與HPLC法相比，檢測靈敏度更高，假陽性率更低。因此，我國將GC-MS法定為檢測CLB的確證性方法（NY/T468~2001）。
高效液相色譜法（HPLC）
HPLC適合測定熱不穩定和強極性的β-激動劑及其代謝產物，而且，HPLC可以與柱前提取、純化及柱后熒光衍生化反應和質譜(MS)等系統聯用，容易實現分析過程的自動化。黃士新等(1995)應用紫外檢測器，在λ=243nm，色譜柱：shimpackCLC-ODS150×6.0mn，流速：1mL/min，柱溫：室溫30℃的條件下檢測豬肝臟和豬肉中的CLB殘留，*低檢測限可達2ng/g[4]。國外有人應用HPLC (二極管陣列檢測器)測定動物性食品中CLB殘留，測得*低檢測限為1.26ng/g，回收率達98.9%[5]。目前，我國已將HPLC法作為檢測CLB殘留的半確證性方法，*低檢測限范圍為1～15ng/g，其優點是專屬性好、選擇性強、檢測**度較高，而且假陽性率低；缺點是樣品處理時間長，檢測過程煩瑣、難于操作，需貴重儀器，在實際應用中受到一定的限制。
酶聯**吸附法（ELISA ）
利用**學抗原抗體特異性結合和酶的高效催化作用，通過化學方法將植物辣根過氧化物酶（HRP）與克倫特羅（CL）結合，形成酶偶聯克倫特羅。將固相載體上已包被的抗體（羊抗兔IgG抗體）與特異性的抗克倫特羅抗體結合，然后加入待測克倫特羅和酶偶聯克倫特羅，它們競爭性與克倫特羅抗體結合，洗滌后加底物，根據有色物的變化計量待測克倫特羅量。若待測克倫特羅多，則被結合的酶偶聯克倫特羅少，有色物量就少。用目測法或比色法測定樣品中的克倫特羅含量，比色的*佳波長為450 nm，參比波長應大于600 nm。
膠體金**層析法（Colloidal gold immunochromatography）
利用競爭法膠體金**層析技術，檢測液中的Clen與金標墊上的金標抗體結合形成復合物，若Clen在檢測液中濃度低于靈敏度值，未結合的金標抗體流到T區時，被固定在膜上的Clen-BSA偶聯物結合，逐漸凝集成一條可見的T線；若Clen濃度高于靈敏度值，金標抗體全部形成復合物，不會再與T線處Clen-BSA偶聯物結合形成可見T線。未固定的復合物流過T區被C區的二抗捕獲并形成可見的C線。C線出現則表明**層析發生，即試紙有效.
檢驗方法
1. 在進行測試前先完整閱讀使用說明書，使用前將試劑板和待檢樣本溶液恢復至室溫。
2. 撕開鋁塑袋，取出試紙。
3. 依據型號進行操作（尿液不得直接浸濕觀察區）。
3.1 將試紙白色一端浸入尿液中（液面不得超過橫線），保持5秒鐘；
3.2 用滴管吸取待檢樣品尿液，逐滴緩慢加入3滴樣品于加樣孔中。
4. 將試紙平放1分鐘，等待紅色條帶出現。
5. 3～8分鐘內讀取結果，10分鐘后判讀無效。
6. [1]  10分鐘內可以檢測出結果
結果判讀
陽性（+）：僅質控區（C）出現一條紫紅色條帶。在測試區（T）內無紫紅色條帶出現。
陰性（-）：兩條紫紅色條帶出現。一條位于測試區（T）內，另一條位于質控區（C）內。
無效：質控區（C）未出現紫紅色條帶，提示測試失敗或試 紙已失效。
注意：測試區（T）內的紫紅色條帶可顯現出顏色深淺的現象。但是，在規定的觀察時間內，不論該色帶顏色深淺，即使只有非常弱的色帶也應判定為陰性結果。
注意事項
1.檢測卡請在保質期內一次性使用。
2.檢測時避免陽光直射和電風扇直吹。
3.盡量不要觸摸檢測卡中央的白色膜面。
4.尿樣滴管不可混用，以免交叉污染。
5.如果尿樣出現沉淀或渾濁物，請離心后再檢測。